2 x Taq PCR Master Mix 使用說明書

2 x Taq PCR Master Mix

產品簡介

2 × Taq PCR Master Mix是即用型的常規PCR預混合溶液，含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及優化的緩沖體系，它以2×的濃度形式存在，反應時只需加入所需引物和模板，用水稀釋即可立刻配制完PCR體系。本產品中含有PCR產物具有3’-dA突出端，可輕松克隆至T載體。

運輸與保存方法
冰袋運輸。收到產品后放到-20 ºC保存，有效期12月以上。

使用方法

1.  反應體系配制（50μl）：

注：針對不同模板的*反應濃度有所不同，下表為50μl反應體系推薦模板使用量，僅供參考。

2.  PCR循環反應條件

注：退火溫度需要根據引物的Tm值調整，一般設置成低于引物Tm值1-2℃即可。

注意事項
1.由于Taq DNA Polymerase室溫下也有一定的反應活性，PCR反應體系配制需在冰上進行。體系混勻后快速置于PCR儀進行反應。這樣可以減少反應準備階段的非特異擴增，有助于得到更好的PCR結果。
2. 引物設計注意事項
2.1 引物3’端zui后一個堿基選擇C或G，端zui后8個堿基應避免出現連續錯配；端盡量避免發卡結構的出現；
2.2 引物Tm值控制在55℃-65℃之間；
2.3 引物額外附加序列，即與模板非配對序列，不應參與引物Tm值計算；
2.4 引物GC含量控制在40%-60%之間；
2.5 正向引物和反向引物Tm值以及GC含量盡可能一致。